植物DirectPCR试剂盒选择指南

1、根据多糖多酚含量选择试剂盒

植物组织中或多或少含有多糖多酚。其中，多糖含量差异对后续PCR反应的影响较小，而多酚含量差异对PCR反应影响较大。

◆对于 多糖含量较高而多酚含量较低的材料，根据需要可以选用植物种子（或叶片）DirectPCR试剂盒，但选用多糖多酚类试剂盒，能够获得更好结果。

◆ 多酚含量高的材料对后续PCR反应影响较大，需要选用多糖多酚类试剂盒，才能够获得较好结果。

我公司已经对常见植物材料进行了多糖多酚测试 ，罗列如下：

A、低含量植物材料：油菜（叶片、种子）、水稻（叶片、种子）、小麦（叶片、种子）、玉米（叶片、种子）、大豆（叶片、种子）。

B、高含量植物材料：拟南芥（种子）、棉花（叶片、种子）、香蕉（叶片、果肉）、桔子（果皮）、马铃薯（块根）、洋葱（鳞叶）、苹果（果实）、芦荟（叶片）、西红柿（果实）。

如果您的样品不在上述已测试材料中，请按照以下方法进行多糖多酚测试：

取20mg左右组织块，或2片7mm直径左右的叶片，放入干净的1.5ml离心管中，加入200ul 200mM NaOH溶液，置于95℃ 10min。裂解完成后，观察其颜色变化，参照以下两种情况选择相应的试剂盒进行PCR实验。

A、如果裂解产物溶液呈绿色或淡黄色，说明该材料多酚含量较低，不影响PCR反应，可选用植物种子（叶片）DirectPCR试剂盒。

B、如果裂解产物溶液呈棕黄色或棕红色，说明该材料多酚含量较高，推荐使用多糖多酚类试剂盒。

2、根据种子体积大小选择试剂盒

在裂解阶段，考虑不同类型种子或组织材料在裂解过程中试剂用量的差异较大，为节约实验成本，用户可根据自己实验材料的大小选择相应的种子（中小型）DirectPCR试剂盒或种子（大型）DirectPCR试剂盒。

材料例举如下：

A、种子（中小型）DirectPCR试剂盒：1-30mg组织切块（边长1-5mm）；1-10mg小型单粒种子（拟南芥、烟草、油菜）；10-50mg中型单粒种子（小麦、水稻）。

B、种子（大型）DirectPCR试剂盒：＞50mg单粒种子（棉花、玉米、大豆）；100mg磨碎样本（直径0.5mm左右颗粒）。

3、根据实验是否需要防污染选择试剂盒

◆ 小量不同样本PCR实验，不需要防PCR产物污染的，可选择普通种子（叶片）DirectPCR试剂盒。

◆ 大量重复相同样本PCR实验，需要防PCR产物污染的，可选择防PCR污染DirectPCR试剂盒（UNG版本）。